Citología Exfoliativa
Cribado y diagnóstico cervical, respiratorio y de serosas
Introducción
La citología exfoliativa es la técnica diagnóstica que estudia células descamadas de superficies epiteliales —cervix, bronquios, pleura, peritoneo, orina— para detectar procesos inflamatorios, infecciosos y neoplásicos. La tinción de Papanicolaou, estandarizada y validada mundialmente, emplea una secuencia tricrómico (hematoxilina + OG-6 + EA50/EA65) que produce una coloración nuclear azul-violeta contrastada con citoplasma verde (células superficiales queratinizadas), rosa (células parabasales y intermedias) y naranja (queratinización). En Biosupplies CC distribuimos el sistema EA-OG Cytological Stain (Cancer Diagnostics), formulado bajo ISO 13485:2016 y con amplia validación para citología convencional y en base líquida.
Puntos clave a considerar
- La fijación inmediata del frotis (antes de que se seque al aire) es el paso más crítico: usar spray citofijador o sumérgir directamente en etanol 95%.
- El sistema EA-OG Cancer Diagnostics incluye OG-6 (para queratina) y EA50/EA65 (mezcla tricrómico) con concentraciones optimizadas para citología convencional y base líquida.
- La diferenciación en ácido acético al 0,5% durante 30–60 segundos determina el contraste final: más tiempo = menos color de fondo, menos tiempo = tonos más intensos.
- En citología en base líquida (ThinPrep/SurePath), los tiempos de tinción difieren ligeramente de la citología convencional; consultar la hoja de instrucciones específica del kit.
- Los criterios de Bethesda 2014 son el sistema de clasificación estándar internacional para citología cervical; su uso garantiza uniformidad en los informes.
- Incluir siempre un portaobjetos control con células normales y anormales conocidas en cada sesión de tinción para verificar la calidad del proceso.
Protocolo
Procedimiento paso a paso
Toma de muestra y extensión
Tomar la muestra con espátula de Ayre (exocérvix) y cepillo endocervical, o con citocepillo combinado. Extender inmediatamente en el portaobjetos en una capa delgada y uniforme. En citología en base líquida, enjuagar directamente el instrumento en el vial con solución conservante.
Fijación inmediata
Para citología convencional: aplicar spray citofijador a 25–30 cm de distancia, cubriendo toda la extensión, o sumergir el portaobjetos inmediatamente en etanol al 95% durante mínimo 15 minutos. NUNCA permitir que el frotis se seque al aire antes de fijar, ya que produce artefactos de desecación irreversibles.
Hidratación
Pasar los portaobjetos por series de etanol de concentración decreciente: etanol 95% → 80% → 70%, 1 minuto en cada paso. Finalizar en agua destilada durante 1 minuto para hidratación completa antes de la hematoxilina.
Tinción con Hematoxilina
Sumergir en Hematoxilina de Mayer (Cancer Diagnostics) durante 3–5 minutos para tinción nuclear. Lavar con agua corriente hasta que el agua salga clara (1–2 minutos). Pasar por alcohol ácido al 0,5% (2–3 inmersiones) para diferenciación y lavar de inmediato. Virar en agua amoniacal al 0,2% durante 30–60 segundos hasta lograr el tono azul-violeta.
Deshidratación parcial y OG-6
Deshidratar brevemente en etanol 70% y 95% (1 min cada uno). Sumergir en OG-6 (Cancer Diagnostics) durante 1,5–2 minutos para teñir las células queratinizadas de color naranja brillante. Lavar con etanol 95% en tres cambios rápidos para eliminar el exceso de colorante.
Tinción con EA (Eosina-Alcohol-Verde Oscuro)
Sumergir en EA50 o EA65 (Cancer Diagnostics) durante 2–3 minutos. Este paso tiñe el citoplasma en tonos verdes, rosas y grises según el tipo y grado de maduración celular. Lavar con etanol 95% (3 cambios rápidos) para diferenciación.
Deshidratación, aclarado y montaje
Deshidratar en etanol 95% (2 min) → etanol 100% (2 × 2 min) → xileno (2 × 3 min). Montar con medio de montaje permanente (CoverSeal-X, Cancer Diagnostics) y cubrir con lamela. Dejar secar horizontal durante 10–15 minutos antes de la lectura.
Preguntas frecuentes
Dudas técnicas comunes
¿Cuál es la diferencia entre citología convencional y en base líquida?
¿Cuándo se clasifica una muestra como 'insatisfactoria'?
¿Los reactivos EA-OG de Cancer Diagnostics son compatibles con teñidores automáticos?
¿Qué diferencia hay entre EA50 y EA65?
Productos
Productos para Citología Exfoliativa
CDI🔬DestacadoHematoxilina de Harris
Hematoxilina de Harris lista para usar, con mordiente de alumbre. Tinción nuclear clásica para H&E de alta calidad. Resultados nÃtidos y consistentes en rutina diagnóstica.
CDI🔬DestacadoHematoxilina de Mayer
Hematoxilina de Mayer, tinción nuclear progresiva sin necesidad de diferenciación. Ideal para inmunohistoquÃmica y citologÃa como contratinción de fondo.
CDI🔬Eosina Y (Lista para Usar)
Eosina Y alcohólica lista para usar para tinción citoplasmática en el protocolo H&E estándar. Produce una coloración rosa brillante con excelente diferenciación de estructuras.
CDI🧫DestacadoColoración Citológica EA-OG (Papanicolaou Modificado)
Sistema de coloración tricrómico citológico EA-OG para frotis y citologÃa en base lÃquida. Compatible con el protocolo de Papanicolaou para diagnóstico cervical y respiratorio.
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