Receptores Hormonales y HER-2
Panel obligatorio en carcinoma de mama invasor
Introducción
El panel de receptores hormonales (ER y PR) junto con HER-2 y el índice proliferativo Ki-67 constituye el estudio inmunohistoquímico más solicitado en patología oncológica mundial. En carcinoma de mama invasor, este panel no es opcional: determina el subtipo molecular del tumor (Luminal A, Luminal B, HER-2 enriquecido o Triple Negativo), define qué pacientes se benefician de terapia hormonal (tamoxifeno, inhibidores de aromatasa), quimioterapia o terapia dirigida anti-HER-2 (trastuzumab). En Venezuela, donde el cáncer de mama es el tumor maligno más frecuente en mujeres, un panel correctamente ejecutado e interpretado puede ser determinante en la supervivencia de la paciente. Biosupplies CC distribuye los anticuerpos Bio SB SP1 (ER), 1E6 (PR), 4B5 (HER-2) y SP6 (Ki-67), todos validados para tejido FFPE y con reconocimiento internacional en los programas EQA NordiQC y UKNEQAS.
Puntos clave a considerar
- ER clon SP1 y PR clon 1E6 son los clones recomendados por ASCO/CAP 2020 como primera opción para receptor estrogénico y progesterona respectivamente.
- Un resultado ER positivo se define con ≥1% de núcleos tumorales con tinción de cualquier intensidad (criterio ASCO/CAP 2020).
- HER-2 score 2+ (equívoco) requiere confirmación por FISH/CISH para determinar la amplificación génica antes de indicar trastuzumab.
- Ki-67 ≥20% define Luminal B cuando ER es positivo y HER-2 negativo; el umbral puede variar según el consenso internacional vigente.
- La tinción de HER-2 debe ser membranosa completa e intensa (3+) para considerarse positiva; el patrón citoplasmático no es evaluable.
- Incluir controles positivos y negativos en cada corrida del panel, idealmente en el mismo portaobjetos que la muestra.
Protocolo
Procedimiento paso a paso
Consideraciones preanalíticas críticas
La fijación es el factor más crítico para la reproducibilidad del panel. El tiempo óptimo en NBF al 10% para carcinoma de mama es 6–72 horas para biopsias core y 6–48 horas para piezas quirúrgicas. Una fijación insuficiente (<6 h) produce resultados falsamente negativos para ER/PR; una fijación excesiva (>72 h) también puede reducir la antigenicidad. Documentar el tiempo de isquemia (tiempo entre extirpación y fijación) y el tiempo de fijación para cada caso.
Recuperación antigénica
ER (SP1) y PR (1E6): HIER en tampón EDTA pH 9.0, 95–98 °C durante 20 min. HER-2 (4B5): HIER en tampón citrato pH 6.0 o EDTA pH 9.0 según el protocolo del laboratorio (verificar con los datos técnicos Bio SB). Ki-67 (SP6): HIER en tampón EDTA pH 9.0 o citrato pH 6.0. Dejar enfriar 20 min a temperatura ambiente antes de continuar.
Incubación con anticuerpos primarios
Aplicar los anticuerpos RTU Bio SB directamente sin preparación adicional. Incubar en cámara húmeda a temperatura ambiente durante 30–60 min, o a 4 °C toda la noche según el protocolo del laboratorio. Lavar 3 × 5 min con PBS/TBS. Para mayor reproducibilidad, mantener constantes el tiempo y la temperatura de incubación entre corridas.
Sistema de detección y revelado
Aplicar sistema de detección HRP-polímero (Cancer Diagnostics). Incubar según indicaciones del fabricante. Revelar con DAB hasta obtener color marrón-dorado en el antígeno (generalmente 3–8 min bajo control microscópico). Para HER-2: verificar que la tinción es exclusivamente membranosa; el fondo citoplasmático puede indicar un problema técnico en la detección.
Contratinción, deshidratación y montaje
Contrastar con Hematoxilina de Mayer (30–60 seg). Deshidratar en series de etanol, aclara en xileno, montar con resina permanente. Para ER/PR y Ki-67, la tinción positiva debe ser nuclear; para HER-2, debe ser membranosa completa.
Lectura e interpretación
ER y PR: estimar el porcentaje de núcleos tumorales positivos con cualquier intensidad (negativo: <1%, positivo débil: 1–10%, positivo: >10%). Registrar también la intensidad media (débil/moderada/fuerte). HER-2: aplicar el score ASCO/CAP: 0 (sin tinción o en <10% de células), 1+ (tinción membranosa incompleta en ≥10%), 2+ (tinción membranosa completa en ≥10% con intensidad moderada), 3+ (tinción membranosa completa e intensa en ≥10%). Ki-67: estimar el % de núcleos tumorales con cualquier tinción nuclear.
Preguntas frecuentes
Dudas técnicas comunes
¿Por qué ER positivo con <1% de células se reporta como negativo?
¿Qué significa un HER-2 2+ (equívoco) y qué sigue?
¿El Ki-67 es reproducible entre laboratorios?
¿Cuál es la clasificación molecular basada en IHQ?
Productos
Productos para Receptores Hormonales y HER-2
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BSB🔬DestacadoAnticuerpo Monoclonal KI-67 (MIB-1)
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BSB🔬DestacadoAnticuerpo Monoclonal p63
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